微核試驗的應用與方法

　　微核試驗是檢測染色體或有絲分裂器損傷的一種遺傳毒性試驗方法。無著絲粒的染色體片段或因紡錘體受損而丟失的整個染色體，在細胞分裂后期仍留在子細胞的胞質內成為微核。

　　

　　目的：化學物質遺傳毒性評價。

　　

　　原理：通過染色體丟失或斷片形成而出現的微核檢測染色體異常。

　　

　　步驟與結果：常用的是嚙齒類動物骨髓嗜多染紅細胞(PCE)微核試驗。以受試物處理嚙齒類動物，然后處死，取骨髓，制片、固定、染色，于顯微鏡下計數PCE中的微核。如果與對照組比較，處理組PCE微核率有統計學意義的增加，并有劑量-反應關系，則可認為該受試物是哺乳動物體細胞的致突變物。

　　
 

　　用微核試驗來評價藥物、放射線、有毒物質等對人體細胞或體外培養細胞遺傳學損傷仍是一個直觀有效可行的方法,在遺傳毒理、醫學、食品、藥物、環境等諸多方面得到了廣泛的應用。微核計數經濟,迅速,簡便,不需要特殊技能,可以統計更多的細胞并實現計算機自動計數。若采用核型穩定的細胞,確立統一的操作協議,進行實驗室間的合作建立數據庫,應用探針技術的微核試驗很可能被納入遺傳毒理學試驗。微核試驗技術的種類很多，包括常規微核試驗、細胞分裂阻滯微核分析法、熒光原位雜交試驗與DNA探針與抗著絲?？贵w染色等方法。

　　

　　1、動物體內細胞微核：主要有骨髓嗜多染紅細胞微核試驗；外周血淋巴細胞微核試驗。

　　

　　2、細胞培養微核試驗；

　　

　　3、蠶豆根尖微核試驗：實驗所用的蠶豆為松滋青皮豆，通過浸種、催芽、染毒、恢復培養、固定、孚爾根染色等步驟后，進行鏡檢。